ഇ.ഡി. മൈത്സ, എൽ.യു. കൊകേവ, എസ്.എൻ. എലൻസ്കി
ഓമിസെറ്റ് ഫൈറ്റോപ്തോറ പകർച്ചവ്യാധികൾ (മോണ്ട്) ഡി ബാരി ഉരുളക്കിഴങ്ങിന്റെയും തക്കാളിയുടെയും അപകടകരമായ രോഗമായ ലേറ്റ് ബ്ലൈറ്റിന് കാരണമാകുന്നു. പ്രാഥമിക ഇനോക്കുലത്തിന്റെ പ്രധാന ഉറവിടങ്ങളിൽ ഒന്ന് പി കട്ടിയുള്ള മതിലുകളുള്ള വിശ്രമ പ്രത്യുൽപാദന ഘടനകളാണ് - ഓസ്പോറുകൾ.
ജനിതകപരമായി വ്യത്യസ്തമായ രക്ഷാകർതൃ സമ്മർദ്ദങ്ങൾ മുറിച്ചുകടക്കുന്നതിന്റെ ഫലമായി രൂപംകൊണ്ട ഹൈബ്രിഡ് ഓസ്പോറുകൾ ജനസംഖ്യയിൽ ജനിതക വൈവിധ്യത്തിന്റെ വർദ്ധനവിന് കാരണമാകുന്നു, ഇതിന്റെ ഫലമായി പുതിയ ഇനങ്ങളിലേക്കും പ്രയോഗിച്ച കുമിൾനാശിനികളിലേക്കും സമ്മർദ്ദങ്ങളെ പൊരുത്തപ്പെടുത്തുന്ന പ്രക്രിയ ത്വരിതപ്പെടുത്തുന്നു.
ഓസ്പോർ രൂപീകരണം പി ലോകത്തെ പല രാജ്യങ്ങളിലും ഈ മേഖല ശ്രദ്ധിക്കപ്പെട്ടു: റഷ്യ (സ്മിർനോവ് et al., 1999), നോർവേ (Hermansen et al., 2002), സ്വീഡൻ (Stromberg et al., 2001), നെതർലാൻഡ്സ് (Kessel et al., 2002) മറ്റ് പ്രദേശങ്ങളും. ഓസ്പോറുകൾക്ക് മണ്ണിൽ 2 വർഷത്തിലധികം നിലനിൽക്കാൻ കഴിയും (Bødker et al., 2006) കൂടാതെ ശൈത്യകാലത്തിനു ശേഷം സസ്യങ്ങളിൽ അണുബാധയുണ്ടാക്കുന്നു (Ulanova et al., 2010; Lehtinen et al., 2002).
ഉരുളക്കിഴങ്ങ് മുൾപടർപ്പിന്റെ വിവിധ തലങ്ങളിലുള്ള ചെടികളുടെ ഇലകൾക്ക് വൈകി വരൾച്ചയെ പ്രതിരോധിക്കാൻ വ്യത്യാസമുണ്ടെന്ന് നേരത്തെ കാണിച്ചിരുന്നു; ഇത് താഴത്തെ ഇലകളിൽ നിന്ന് മുകൾഭാഗത്തേക്ക് വർദ്ധിക്കുന്നു. ഈ പ്രവണത ഇലയുടെ പ്രായം, ചെടികളുടെ പ്രായം, ഉരുളക്കിഴങ്ങ് ഇനം എന്നിവയെ ആശ്രയിക്കുന്നില്ല (Vesper et al., 2003). അതേ സമയം, സാഹിത്യത്തിൽ ഉരുളക്കിഴങ്ങ് മുൾപടർപ്പിന്റെ വിവിധ പാളികളുടെ ഇലകളിൽ ഓസ്പോർ രൂപീകരണത്തിന്റെ തീവ്രതയിലെ വ്യത്യാസങ്ങളെക്കുറിച്ചുള്ള ഡാറ്റ കണ്ടെത്താൻ ഞങ്ങൾക്ക് കഴിഞ്ഞില്ല. എന്നിരുന്നാലും, അത്തരം വ്യത്യാസങ്ങൾ നിലവിലുണ്ടെങ്കിൽ, ഓസ്പോർ രൂപീകരണത്തിന്റെ വിശകലനത്തിനായി ഇല സാമ്പിളുകൾ എടുക്കുമ്പോഴും മറ്റ് രചയിതാക്കൾ ലഭിച്ച ഫലങ്ങൾ വ്യാഖ്യാനിക്കുമ്പോഴും അവ കണക്കിലെടുക്കണം. ഈർപ്പമുള്ള അറകളിൽ ഒരേ അവസ്ഥയിൽ സ്ഥാപിച്ചിരിക്കുന്ന ഒരു ഉരുളക്കിഴങ്ങ് ചെടിയുടെ വിവിധ പാളികളിലെ വേർപെടുത്തിയ ഇലകളിൽ ഓസ്പോറുകളുടെ രൂപീകരണം പഠിക്കുക എന്നതായിരുന്നു ഈ കൃതിയുടെ ലക്ഷ്യം.
വസ്തുക്കളും രീതികളും
ഞങ്ങൾ 5 ഐസൊലേറ്റുകൾ ഉപയോഗിച്ചു പി മോസ്കോ, റിയാസാൻ, ലെനിൻഗ്രാഡ് പ്രദേശങ്ങളിൽ നിന്ന് കൊണ്ടുവന്ന ബാധിത സാമ്പിളുകളിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചെടുത്ത വ്യത്യസ്ത തരം ഇണചേരൽ. ഇതിൽ, അഗർ ഓട്സ് മീഡിയത്തിൽ പരീക്ഷിച്ചപ്പോൾ സമൃദ്ധമായ ഓസ്പോറുകൾ നൽകുന്ന വ്യത്യസ്ത ഇണചേരലുകളുടെ 3 ജോഡി സ്ട്രെയിനുകൾ തിരഞ്ഞെടുത്തു.
പരിശോധനയ്ക്കായി, ഞങ്ങൾ ഒരു ഹരിതഗൃഹത്തിൽ (ഒരു തത്വം അടിവസ്ത്രത്തിൽ) വളരുന്ന ഇനിപ്പറയുന്ന ഇനങ്ങളുടെ വൈറസ് രഹിത ഉരുളക്കിഴങ്ങ് ചെടികൾ ഉപയോഗിച്ചു: ആദ്യകാല സാൻഡ്രിൻ, സോറച്ച, ഉലദാർ, ഒസിരിസ്, മിഡ്-ആദ്യകാല ഇലിൻസ്കി, മിഡ്-സീസൺ യാങ്ക.
ഉരുളക്കിഴങ്ങ് ചെടിയുടെ വിവിധ തലങ്ങളിൽ നിന്നുള്ള ലളിതമായ ഇലകൾ വിശകലനത്തിനായി തിരഞ്ഞെടുത്തു. താഴത്തെ തലത്തിൽ നിന്ന് മൂന്ന് ഇലകൾ (4 താഴ്ന്ന സംയുക്ത ഇലകൾ), മുകളിൽ നിന്ന് മൂന്ന് (മുകളിൽ 3-4 സംയുക്ത ഇലകൾ), മുൾപടർപ്പിന്റെ മധ്യഭാഗത്ത് നിന്ന് മൂന്ന് ഇലകൾ എന്നിവ തിരഞ്ഞെടുത്തു. ലളിതമായ ഇലകൾ തൂക്കി, കോർഡിനേറ്റ് പേപ്പറിൽ ഫോട്ടോയെടുത്തു (വോളിയവും വിസ്തീർണ്ണവും കണക്കാക്കാൻ), തുടർന്ന് അണുവിമുക്തമായ ജലത്തിന്റെ ഉപരിതലത്തിൽ തലകീഴായി വയ്ക്കുക, പെട്രി വിഭവങ്ങളിൽ 25 മില്ലി ഒഴിച്ചു. ഇണചേരൽ തരത്തിലുള്ള എ1, എ2 എന്നീ സൂസ്പോറൻജിയ ഐസൊലേറ്റുകളുടെ മിശ്രിത സസ്പെൻഷന്റെ ഒരു തുള്ളി ഓരോ ഇലയിലും ബാധിച്ചു. ഓരോ ലെവലിൽ നിന്നും എടുത്ത മൂന്ന് ഇലകൾക്ക്, മൂന്ന് വ്യത്യസ്ത ജോഡി ഐസൊലേറ്റുകളുടെ ഒരു ഇനോക്കുലം ഉപയോഗിച്ചു. ഒരു ജോടി ഐസൊലേറ്റുകളുടെ ഇനോകുലം മിശ്രിതം ഒരു ഇലയിൽ ബാധിച്ചു.
zoosporangia ഒരു സസ്പെൻഷൻ തയ്യാറാക്കാൻ, 7 ദിവസത്തേക്ക് അഗർ ഓട്സ് മീഡിയത്തിൽ വ്യത്യസ്ത ഇണചേരൽ തരങ്ങളുടെ ഒറ്റപ്പെടലുകൾ വളർത്തി, അതിനുശേഷം zoosporangia അണുവിമുക്തമായ വാറ്റിയെടുത്ത വെള്ളം ഉപയോഗിച്ച് കഴുകി. 5x മാഗ്നിഫിക്കേഷനിൽ മൈക്രോസ്കോപ്പിന്റെ വ്യൂ ഫീൽഡിൽ 7-80 സൂസ്പോറുകളായിരുന്നു ഇനോക്കുലത്തിന്റെ സാന്ദ്രത. ഇണചേരൽ തരത്തിലുള്ള എ1, എ2 ഐസൊലേറ്റുകളുടെ സൂസ്പോറൻജിയയുടെ ഒരു തുള്ളി മിക്സഡ് സസ്പെൻഷൻ ഉപയോഗിച്ച് ഓരോ ഇലയും മലിനമാക്കപ്പെട്ടു.
എല്ലാ പരീക്ഷണങ്ങളിലും, ഓരോ വേരിയന്റിലും 3 ഉരുളക്കിഴങ്ങ് ഇലകൾ ഉപയോഗിച്ചു. 20 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ 18 ദിവസം ഇൻകുബേഷൻ ചെയ്ത ശേഷം, ഓരോ ഇലയും 2 മില്ലി വാറ്റിയെടുത്ത വെള്ളം ഉപയോഗിച്ച് ഒരു മോർട്ടറിൽ ഏകീകരിച്ചു. തത്ഫലമായുണ്ടാകുന്ന സസ്പെൻഷനിൽ നിന്ന്, 3 സാമ്പിളുകൾ എടുത്തു, അതിൽ നിന്ന് മൈക്രോസ്കോപ്പിക്കുള്ള തയ്യാറെടുപ്പുകൾ തയ്യാറാക്കി.
ഓരോ വേരിയന്റിലും, 180 വിഷ്വൽ ഫീൽഡുകൾ പരിശോധിച്ചു, അതിനുശേഷം 1 മില്ലിമീറ്ററിൽ ഓസ്പോറുകളുടെ എണ്ണം വീണ്ടും കണക്കാക്കി.2 ഷീറ്റിന്റെ ഉപരിതലം. ഓരോ വേരിയന്റിനുമുള്ള എണ്ണൽ ഫലങ്ങൾ ശരാശരിയാണ്.
0,05 എന്ന പ്രാധാന്യ നിലയ്ക്കുള്ള കോൺഫിഡൻസ് ഇന്റർവെൽ (μ) കണക്കാക്കാൻ, ഇനിപ്പറയുന്ന ഫോർമുല ഉപയോഗിച്ചു
ഇവിടെ s എന്നത് സ്റ്റാൻഡേർഡ് ഡീവിയേഷൻ ആണ്, n എന്നത് അളവുകളുടെ എണ്ണമാണ്, t എന്നത് 0,05 എന്ന പ്രാധാന്യമുള്ള ലെവലിനുള്ള t-ടെസ്റ്റ് സ്ഥിരാങ്കമാണ്. എല്ലാ കണക്കുകൂട്ടലുകളും Excel-ൽ (മൈക്രോസോഫ്റ്റ് ഓഫീസ് പാക്കേജ്) നടത്തി.
ഫലങ്ങളും ചർച്ചകളും
ഒരു ഉരുളക്കിഴങ്ങ് മുൾപടർപ്പിന്റെ വിവിധ പാളികളിൽ നിന്ന് ഇലകൾ ശേഖരിച്ച് ഈർപ്പമുള്ള അറകളിൽ അതേ അവസ്ഥയിൽ വയ്ക്കുന്നത് ഓസ്പോർ രൂപീകരണത്തിന്റെ തീവ്രതയിൽ വ്യത്യാസങ്ങൾ കണ്ടെത്തി. പഠിച്ച എല്ലാ ഇനങ്ങളിലും, മുൾപടർപ്പിന്റെ താഴത്തെ, മധ്യ നിരകളിൽ നിന്ന് ശേഖരിക്കുന്ന ഇലകളുടെ കുത്തിവയ്പ്പ് സമയത്ത് പരമാവധി എണ്ണം ഓസ്പോറുകൾ രൂപപ്പെട്ടു. താഴത്തെ ഇലകളിലും മധ്യഭാഗങ്ങളിലും ഓസ്പോറുകളുടെ രൂപീകരണത്തിൽ കാര്യമായ വ്യത്യാസങ്ങളൊന്നും കണ്ടെത്തിയില്ല.
മുകളിലെ പാളിയിലെ ഇലകളിൽ (ചിത്രം 1) ഏറ്റവും കുറഞ്ഞ എണ്ണം ഓസ്പോറുകൾ രൂപപ്പെട്ടു.
താഴ്ന്ന, മധ്യ നിരകളിലെ ഇലകളിൽ, സാൻഡ്രിൻ, ഇലിൻസ്കി, സോറച്ച, ഉലദാർ, ഒസിരിസ് എന്നീ ഇനങ്ങളിൽ പരമാവധി ഓസ്പോറുകൾ രൂപപ്പെട്ടു. യാങ്ക ഇനത്തിന്റെ ഇലകളിൽ അവ കുറച്ച് തീവ്രതയോടെ രൂപപ്പെട്ടു. മുകളിലെ പാളിയിലെ ഇലകളിലെ പരമാവധി എണ്ണം ഓസ്പോറുകൾ ഉലദാർ ഇനത്തിന്റെ ഇലകളിൽ നിരീക്ഷിച്ചു; തുടർന്ന്, കുറയുന്ന ക്രമത്തിൽ, സോറച്ച, ഒസിരിസ്, യാങ്ക, ഇലിൻസ്കി, സാൻഡ്രിൻ പോയി, പക്ഷേ എല്ലാ വ്യത്യാസങ്ങളും സ്ഥിതിവിവരക്കണക്കിൽ പ്രാധാന്യമർഹിക്കുന്നില്ല.
അരി. 1. ഉരുളക്കിഴങ്ങ് മുൾപടർപ്പിന്റെ വിവിധ പാളികളുടെ ഇലകളിൽ ഓസ്പോറുകളുടെ രൂപീകരണം. താഴെയുള്ളവ മുൾപടർപ്പിന്റെ മൂന്ന് താഴത്തെ നിലകളുടെ ഇലകളാണ്, മുകളിലുള്ളവ ചെടിയുടെ മുകളിൽ നിന്നുള്ള 3-4 സങ്കീർണ്ണമായ ഇലകളാണ്, മധ്യഭാഗം മുൾപടർപ്പിന്റെ മധ്യത്തിൽ നിന്നാണ്.
പിശക് ബാറുകൾ 0,05 എന്ന പ്രാധാന്യ നിലയ്ക്കുള്ള ആത്മവിശ്വാസ ഇടവേള കാണിക്കുന്നു.
വയലിൽ, മൈക്രോക്ളൈമാറ്റിക് അവസ്ഥകളും മുൾപടർപ്പിന്റെ താഴത്തെ ഇലകളിൽ ഓസ്പോറുകളുടെ രൂപീകരണത്തിന് കാരണമാകുന്നു: ഉയർന്ന ആർദ്രത, കുറഞ്ഞ സൗരോർജ്ജം, ദൈനംദിന താപനിലയിലെ ഏറ്റക്കുറച്ചിലുകൾ (ഹാരിസൺ, 1992). മുകളിൽ തളിക്കുന്നത് കുറ്റിക്കാട്ടിന്റെ അടിയിലും മധ്യഭാഗത്തും കീടനാശിനികൾ കുറയുന്നു. ഓസ്പോറുകളുടെ രൂപീകരണം കുറയ്ക്കുന്നതിന്, മുൾപടർപ്പിന്റെ താഴത്തെ ഭാഗങ്ങളിലും മധ്യഭാഗങ്ങളിലും കുമിൾനാശിനികൾ വിജയകരമായി വിതരണം ചെയ്യാൻ അനുവദിക്കുന്ന സാങ്കേതികവിദ്യകൾ ഉപയോഗിക്കണം. പ്രക്ഷുബ്ധമായ എയർ സ്പ്രേയറുകളും ചികിൽസയില്ലാത്ത മുൾപടർപ്പിന്റെ ഭാഗങ്ങളിൽ വ്യാപിക്കുന്ന വ്യവസ്ഥാപരമായ കുമിൾനാശിനികളും ഉപയോഗിച്ച് നല്ല ഫലങ്ങൾ ലഭിക്കും.
റഷ്യൻ സയൻസ് ഫൗണ്ടേഷൻ (പ്രോജക്റ്റ് നമ്പർ 14-50-00029) ഈ ജോലിയെ പിന്തുണച്ചു.
ലേഖനം "ഉരുളക്കിഴങ്ങ് സംരക്ഷണം" (നമ്പർ 2, 2015) ജേണലിൽ പ്രസിദ്ധീകരിച്ചു.