ഡി. യു. റിയാസന്ത്സെവ്, ഇ. എം. ചുഡിനോവ, എൽ. യു. കൊക്കീവ, എസ്. എൻ. എലാൻസ്കി, പി. എൻ. ബാലബ്കോ, ജി. എൽ. ബെലോവ, എസ്. കെ. സാവ്രീവ്
കൊളോട്ടോട്രിചം കൊക്കോഡുകൾ എന്ന ഫൈറ്റോപാത്തോജെനിക് ഫംഗസ് ഉരുളക്കിഴങ്ങിലും തക്കാളിയിലും ആന്ത്രാക്നോസ്, കിഴങ്ങുവർഗ്ഗങ്ങൾ എന്നിവ അറിയപ്പെടുന്ന അപകടകരമായ രോഗങ്ങൾക്ക് കാരണമാകുന്നു. രൂപാന്തര സ്വഭാവമനുസരിച്ച്, മറ്റ് സൂക്ഷ്മാണുക്കൾ മൂലമുണ്ടാകുന്ന രോഗങ്ങളിൽ നിന്ന് അവയെ വേർതിരിച്ചറിയാൻ പലപ്പോഴും ബുദ്ധിമുട്ടാണ്; പച്ച തക്കാളി പഴങ്ങളിൽ, രോഗം ലക്ഷണങ്ങളില്ലാത്തതാകാം, പഴുത്ത ചുവന്ന പഴങ്ങളിൽ മാത്രം പ്രത്യക്ഷപ്പെടുന്നു. രോഗകാരിയുടെ ദ്രുതവും കൃത്യവുമായ രോഗനിർണയത്തിനായി, ഒരു തത്സമയ പിസിആർ പരിശോധന സംവിധാനം വാഗ്ദാനം ചെയ്യുന്നു. ഒരു പരീക്ഷണ സംവിധാനം വികസിപ്പിക്കുന്നതിന്, റഷ്യയിലെ വിവിധ പ്രദേശങ്ങളിലെ ഉരുളക്കിഴങ്ങ് കിഴങ്ങുകളിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചെടുത്ത 45 സി കൊക്കോഡ് സമ്മർദ്ദങ്ങളുടെ ഗ്ലിസറോൾ ട്രൈഫോസ്ഫേറ്റ് ഡൈഹൈഡ്രജനോയിസ് ജീനിന്റെ ന്യൂക്ലിയോടൈഡ് ശ്രേണി നിർണ്ണയിക്കപ്പെട്ടു.
ലഭിച്ച ഫലങ്ങളെയും ജെൻബാങ്ക് ഡാറ്റാബേസിൽ ലഭ്യമായ മറ്റ് ജീവജാലങ്ങളുടെ സമാന ശ്രേണികളുടെ വിശകലനത്തെയും അടിസ്ഥാനമാക്കി, സ്പീഷിസ്-നിർദ്ദിഷ്ട പ്രൈമറുകളും സി. കൊക്കോഡുകളുടെ അന്വേഷണവും രൂപകൽപ്പന ചെയ്തിട്ടുണ്ട്. സൃഷ്ടിച്ച ടെസ്റ്റ് സിസ്റ്റത്തിന്റെ പ്രത്യേകത പരിശോധിക്കുന്നതിന്, തക്കാളി, ഉരുളക്കിഴങ്ങ് സസ്യങ്ങളുമായി ബന്ധപ്പെട്ട 15 വ്യത്യസ്ത പരാന്നഭോജികൾ, സാപ്രോട്രോഫിക് ഫംഗസുകൾ എന്നിവയുടെ ശുദ്ധമായ സംസ്കാരങ്ങളിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചെടുത്ത ഡിഎൻഎ ഉപയോഗിച്ചാണ് പിസിആർ നടത്തിയത് (ഫ്യൂസാറിയം ഓക്സിസ്പോറം, എഫ്. ഫെലിനസ് ഫെറുഗിനോവെലൂട്ടിനസ്, സ്റ്റെംഫിലിയം വെസിക്കേറിയം, ഹെൽമിന്തോസ്പോറിയം സോളാനി, ഫോമോപ്സിസ് ഫാസോളി, നിയോനെക്ട്രിയ റാഡിക്കോള, റൈസോക്റ്റോണിയ സോളാനി, പെൻസിലിയം എസ്പി., ക്ലാഡോസ്പോറിയം ഫുൾവം, സി. ക്ലാഡോസ്പോറിയോയിഡുകൾ). കൊളോട്ടോട്രികം കൊക്കോഡ്സ് ഡിഎൻഎയുടെ സാന്നിധ്യം 20–27 എന്ന പരിധി ചക്രത്തിൽ നിർണ്ണയിക്കപ്പെട്ടു, മറ്റ് ജീവികളെ 40 ചക്രങ്ങൾക്ക് ശേഷം കണ്ടെത്തി അല്ലെങ്കിൽ കണ്ടെത്താനായില്ല. വിശകലനം ചെയ്ത പിസിആർ മിശ്രിതത്തിൽ 0.01 എൻജി / എംഎം 3 ൽ കൂടുതലുള്ള സി. കൊക്കോഡ്സ് ഡിഎൻഎ സാന്ദ്രത വിശ്വസനീയമായി കണ്ടെത്തുന്നത് ടെസ്റ്റ് സിസ്റ്റം സാധ്യമാക്കുന്നു. വികസിത പരീക്ഷണ സമ്പ്രദായം ഉപയോഗിച്ച്, ഫംഗസ് രോഗങ്ങളുടെ ലക്ഷണങ്ങളുള്ള തക്കാളി ഇലകളിലും രോഗത്തിന്റെ ബാഹ്യ ലക്ഷണങ്ങളില്ലാതെ ഉരുളക്കിഴങ്ങ് കിഴങ്ങുകളിലും സി. കൊക്കോഡുകളുടെ സാന്നിധ്യം അന്വേഷിച്ചു. ക്രാസ്നോഡാർ പ്രദേശത്തെ രണ്ട് വ്യത്യസ്ത മേഖലകളിൽ നിന്ന് കിഴങ്ങുവർഗ്ഗങ്ങൾ - കോസ്ട്രോമ, മോസ്കോ, കലുഗ, നിഷ്നി നോവ്ഗൊറോഡ് മേഖലകളിലെ വയലുകളിൽ നിന്ന് ഫംഗസ് അണുബാധയുടെ ലക്ഷണങ്ങളുള്ള ഇലകൾ ശേഖരിച്ചു. സി. കൊക്കോഡ്സ് ഡിഎൻഎ അടങ്ങിയ ഒരു തക്കാളി ഇല ക്രാസ്നോഡാർ പ്രദേശത്ത് നിന്ന് കണ്ടെത്തി; കോസ്ട്രോമ, മോസ്കോ, കലുഗ പ്രദേശങ്ങളിൽ വളരുന്ന കിഴങ്ങുവർഗ്ഗങ്ങളുടെ 5 സാമ്പിളുകളിൽ ഈ രോഗകാരിയുടെ ഡിഎൻഎയുടെ ഗണ്യമായ സാന്നിധ്യം കണ്ടെത്തി.
ആമുഖം
ധാന്യങ്ങൾ, പച്ചക്കറികൾ, bs ഷധസസ്യങ്ങൾ, വറ്റാത്ത പഴങ്ങൾ, ബെറി സസ്യങ്ങൾ എന്നിവയെ ബാധിക്കുന്ന അപകടകരമായ ഫൈറ്റോപാഥോജനുകളാണ് കൊളോട്ടോട്രിചം ജനുസ്സിലെ കൂൺ. ഈ ജനുസ്സിലെ സർവ്വവ്യാപിയായ ഇനങ്ങളിലൊന്നായ കോലെറ്റോട്രിച്ചം കൊക്കോഡുകൾ (വാൾ).
ആന്ത്രാക്നോസിന്റെയും ഉരുളക്കിഴങ്ങിന്റെയും തക്കാളിയുടെയും കറുത്ത പാടാണ് ഹ്യൂസ്, കൂടാതെ സോളനേഷ്യ കുടുംബത്തിലെ മറ്റ് നിരവധി സസ്യങ്ങളുടെ രോഗങ്ങൾക്കും കാരണമാകുന്നു. കളകൾ (ഡില്ലാർഡ്, 1992). സി. കൊക്കോഡുകൾ ചെടിയുടെ ഭൂഗർഭ ഭാഗങ്ങൾ, സ്റ്റെം ബേസുകൾ, ഇലകൾ, പഴങ്ങൾ എന്നിവയെ ബാധിക്കുന്നു (ആൻഡ്രിവോൺ മറ്റുള്ളവരും, 1998; ജോൺസൺ, 1994). രോഗം ബാധിച്ച ഉരുളക്കിഴങ്ങ് കിഴങ്ങുവർഗ്ഗത്തിൽ, വ്യക്തമായും ഉച്ചരിച്ച അരികുകളുള്ള ചാരനിറത്തിലുള്ള പാടുകളുടെ വികസനം നിരീക്ഷിക്കപ്പെടുന്നു, അതിൽ കറുത്ത കുത്തുകളായ സ്പോറുലേഷനും മൈക്രോസ്ക്ലെറോറ്റിയയും വ്യക്തമായി കാണാം. സംഭരണ സമയത്ത്, കിഴങ്ങുകളുടെ പൾപ്പിൽ മൃദുവായ ഉള്ളടക്കമുള്ള അൾസർ ഉണ്ടാകാം, അതായത്. ഈ രോഗം ആന്ത്രാക്നോസ് ഘട്ടത്തിലേക്ക് പ്രവേശിക്കുന്നു, എന്നിരുന്നാലും ഇത് വളരെ അപൂർവമാണ്.
അതേസമയം, തക്കാളി പഴങ്ങളിൽ ആന്ത്രാക്നോസിന്റെ (ചെറിയ കറുത്ത ഡോട്ടുകളുള്ള ചർമ്മ അൾസർ) ലക്ഷണങ്ങൾ സാധാരണമാണ്. ഇലകളിൽ, സി. കൊക്കോഡുകളുടെ ലക്ഷണങ്ങൾ ഇരുണ്ട തവിട്ടുനിറത്തിലുള്ള പാടുകളായി കാണപ്പെടുന്നു, സാധാരണയായി മഞ്ഞ ടിഷ്യുവിന്റെ അതിർത്തിയാണ് (ജോൺസൺ, 1994).
കിഴങ്ങുകളിൽ കറുത്ത പുള്ളിയുടെ വികസനം അവയുടെ രൂപത്തെ നശിപ്പിക്കുന്നു, ഇത് കഴുകിയ ചുവന്ന തൊലി ഉരുളക്കിഴങ്ങ് വിൽക്കുമ്പോൾ പ്രത്യേകിച്ചും ഉച്ചരിക്കപ്പെടുന്നു. പീൽ പുറംതള്ളൽ അമിത ബാഷ്പീകരണത്തിനും സംഭരണ നഷ്ടത്തിനും കാരണമാകുന്നു (വിശപ്പും മക്കിന്റൈറും, 1979). മറ്റ് സസ്യ അവയവങ്ങളുടെ നാശനഷ്ടം വിളവ് നഷ്ടപ്പെടുന്നതിലേക്ക് നയിക്കുന്നു, ഇത് തുറന്നതും അടച്ചതുമായ നിലങ്ങളിൽ രേഖപ്പെടുത്തിയിട്ടുണ്ട് (ജോൺസൺ, 1994; ട്രോസർ മറ്റുള്ളവരും, 1999). റഷ്യ ഉൾപ്പെടെ ലോകത്തിലെ മിക്കവാറും എല്ലാ ഉരുളക്കിഴങ്ങ് ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്ന പ്രദേശങ്ങളിലും സി. കൊക്കോഡുകൾ മൂലമുണ്ടാകുന്ന രോഗങ്ങൾ സാധാരണമാണ് (ലീസ, ഹിൽട്ടൺ, 2003; ബെലോവ് മറ്റുള്ളവരും, 2018). സി. കൊക്കോഡുകൾക്കെതിരായ നിലവിലുള്ള കുമിൾനാശിനികളുടെ അപര്യാപ്തത, പ്രതിരോധശേഷിയുള്ള ഇനങ്ങളുടെ അഭാവം എന്നിവ കാരണം ഈ രോഗങ്ങളുടെ നിയന്ത്രണം ബുദ്ധിമുട്ടാണ് (വായിക്കുക, മറയ്ക്കുക, 1995).
സി. കൊക്കോഡ്സ് ബൈനോക്കുലം വിത്ത് കിഴങ്ങുകളിൽ തുടരാം (വായിക്കുക, മറയ്ക്കുക, 1988; ജോൺസൺ മറ്റുള്ളവർ, 1997), തക്കാളി വിത്തുകൾ (ബെൻ-ഡാനിയേൽ മറ്റുള്ളവർ, 2010), സസ്യ അവശിഷ്ടങ്ങളിൽ മണ്ണിൽ വളരെക്കാലം നിലനിൽക്കുന്നു (ഡില്ലാർഡ്, 1990 ; ഡില്ലാർഡ്, കോബ്, 1993) കളകളിൽ (റെയ്ഡ്, പെന്നിപാക്കർ, 1987). നിരവധി എഴുത്തുകാർ (വായിക്കുക, മറയ്ക്കുക, 1988; ബാർക്ക്ഡോൾ, ഡേവിസ്, 1992; ജോൺസൺ മറ്റുള്ളവർ, 1997; ഡില്ലാർഡ്, കോബ്, 1993) ഉരുളക്കിഴങ്ങിലും തക്കാളികളിലും രോഗത്തിന്റെ വികസനം പ്രധാനമായും വിത്തിലും ഇനോക്കുലത്തിന്റെ സാന്നിധ്യത്തെയും ആശ്രയിച്ചിരിക്കുന്നുവെന്ന് തെളിയിച്ചിട്ടുണ്ട്. മണ്ണ്. അതിനാൽ, രോഗത്തിൽ നിന്നുള്ള നഷ്ടം കുറയ്ക്കുന്നതിന്, വിത്ത് വസ്തുക്കളിൽ, മണ്ണിൽ, വിത്ത് ഉരുളക്കിഴങ്ങ് കിഴങ്ങുവർഗ്ഗങ്ങളിലും സംഭരണത്തിനായി വച്ചിരിക്കുന്ന തക്കാളി വിത്തുകളിലും ഫംഗസിന്റെ പ്രചരണം നിർണ്ണയിക്കാൻ (അളവ് ഉൾപ്പെടെ) ആവശ്യമാണ്. മണ്ണിലെയും സസ്യ വസ്തുക്കളിലെയും രൂപാന്തര ഡയഗ്നോസ്റ്റിക്സ് മൈക്രോസ്ക്ലെറോട്ടിയയുടെ സാന്നിധ്യത്താൽ മാത്രമേ നടത്താൻ കഴിയൂ, എന്നിരുന്നാലും മറ്റ് തരത്തിലുള്ള ഫംഗസുകളിലും ഇത് കാണപ്പെടുന്നു.
കിഴങ്ങുകളിലെ ലക്ഷണങ്ങൾ ഹെൽമിന്തോസ്പോറിയം സോളാനി എന്ന ഫംഗസ് മൂലമുണ്ടാകുന്ന വെള്ളി ചുണങ്ങുമായി വളരെ സാമ്യമുള്ളതാണ്. കൊളോട്ടോട്രികം കൊക്കോഡുകളും ഹെൽമിന്തോസ്പോറിയം സോളാനിയും ശുദ്ധമായ ഒരു സംസ്കാരത്തിലേക്ക് വേർതിരിക്കുന്നത് വളരെ ബുദ്ധിമുട്ടാണ്, കൂടാതെ പോഷക മാധ്യമത്തിലെ മന്ദഗതിയിലുള്ള വളർച്ച കാരണം ഇത് വളരെയധികം സമയമെടുക്കുന്നു. കൊളോട്ടോട്രികം കൊക്കോഡുകൾ വേഗത്തിൽ തിരിച്ചറിയാൻ, ഉപകരണ ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് രീതികൾ ഉപയോഗിക്കേണ്ടത് ആവശ്യമാണ്. പോളിമറേസ് ചെയിൻ പ്രതികരണവും (പിസിആർ) അതിന്റെ പരിഷ്ക്കരണവും - തത്സമയ പിസിആർ ആണ് ഏറ്റവും സൗകര്യപ്രദമായ രീതി. നിലവിൽ, ആർഡിഎൻഎയുടെ ഐടിഎസ് 2002 പ്രദേശത്തിനായി ബ്രിട്ടീഷ് ഗവേഷകർ (കുള്ളൻ മറ്റുള്ളവർ, 1) വികസിപ്പിച്ചെടുത്ത ഒരു ടെസ്റ്റ് സിസ്റ്റം യൂറോപ്പിലും അമേരിക്കയിലും ഉപയോഗിക്കുന്നു. റഷ്യൻ ഇൻസുലേറ്റുകളുടെ വിശകലനത്തിൽ അതിന്റെ ഉപയോഗം നല്ല ഫലങ്ങൾ കാണിച്ചു (ബെലോവ് മറ്റുള്ളവരും, 2018). എന്നിരുന്നാലും, സി. കൊക്കോഡുകൾ വളരെ വേരിയബിൾ ആണ്, ഒരൊറ്റ ഡിഎൻഎ സീക്വൻസിൽ നിന്ന് ഇത് കണ്ടെത്തുന്നത് തെറ്റായ നെഗറ്റീവ് ഫലങ്ങളിലേക്ക് നയിച്ചേക്കാം. കൂടുതൽ വിശ്വസനീയമായ രോഗനിർണയത്തിനായി, നിരവധി സ്പീഷിസ്-നിർദ്ദിഷ്ട ഡിഎൻഎ സീക്വൻസുകൾക്കായി വിശകലനം ആവശ്യമാണ്, അതിനാൽ ഗ്ലൈസെരാൾഡിഹൈഡ് -3-ഫോസ്ഫേറ്റ് ഡൈഹൈഡ്രജനോയിസ് ജീനിന്റെ ക്രമത്തിൽ സി. കൊക്കോഡുകളെ തിരിച്ചറിയാൻ അനുവദിക്കുന്ന ഒരു യഥാർത്ഥ ടെസ്റ്റ് സിസ്റ്റം ഞങ്ങൾ വികസിപ്പിച്ചെടുത്തിട്ടുണ്ട്.
വസ്തുക്കളും രീതികളും
സൃഷ്ടിച്ച പരീക്ഷണ സംവിധാനങ്ങളുടെ ഫലപ്രാപ്തിയും സവിശേഷതയും വിലയിരുത്തുന്നതിന്, തക്കാളി ഇലകളുടെയും പഴങ്ങളുടെയും രോഗബാധിതമായ സാമ്പിളുകൾ, ഉരുളക്കിഴങ്ങ് കിഴങ്ങുവർഗ്ഗങ്ങൾ (പട്ടിക 15) എന്നിവയിൽ നിന്ന് രചയിതാക്കൾ വേർതിരിച്ചെടുത്ത 1 ഇനം ഫംഗസുകളുടെ ശുദ്ധമായ സംസ്കാരങ്ങൾ ഞങ്ങൾ ഉപയോഗിച്ചു. ഒറ്റപ്പെടലിനായി, ഫംഗസ് അണുബാധയുടെ ലക്ഷണങ്ങളുള്ള സസ്യങ്ങളുടെ അവയവങ്ങൾ എടുത്തിട്ടുണ്ട്, ഓരോ മുൾപടർപ്പിനും ഒന്നിൽ കൂടുതൽ അവയവങ്ങളില്ല.
ഒരു കിഴങ്ങുവർഗ്ഗത്തിന്റെ ഒരു കഷ്ണം, ഒരു തക്കാളി പഴത്തിന്റെ ഒരു കഷ്ണം, ബാധിച്ച ഇല എന്നിവ ഒരു ബൈനോക്കുലർ മൈക്രോസ്കോപ്പിന് കീഴിൽ സ്ഥാപിച്ചു, അതിനുശേഷം മൈസീലിയം, സ്വെർഡ്ലോവ് അല്ലെങ്കിൽ ടിഷ്യു കഷണം എന്നിവ പെട്രി വിഭവത്തിൽ മൂർച്ചയുള്ള വിഘടിക്കുന്ന സൂചി ഉപയോഗിച്ച് ഒരു അഗർ മീഡിയത്തിലേക്ക് (വോർട്ട് അഗർ) മാറ്റി. ടെസ്റ്റ് ട്യൂബുകളിൽ അഗർ ചെരിവിൽ 4 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ ഇൻസുലേറ്റുകൾ സൂക്ഷിച്ചു.
വിശകലനം ചെയ്യാൻ ഉദ്ദേശിച്ചുള്ള ഫംഗസ് രോഗങ്ങളുടെ ലക്ഷണങ്ങളുള്ള തക്കാളി ഇലകളുടെ സാമ്പിളുകൾ ശേഖരിച്ച ഉടൻ തന്നെ (വയലിൽ) 70% എഥൈൽ മദ്യത്തിൽ സ്ഥാപിക്കുകയും അതിൽ ഡിഎൻഎ ഒറ്റപ്പെടൽ വരെ സൂക്ഷിക്കുകയും ചെയ്തു. ഉരുളക്കിഴങ്ങ് കിഴങ്ങുവർഗ്ഗങ്ങൾ ലബോറട്ടറിയിൽ എത്തിക്കുകയും അവയിൽ നിന്ന് തൊലി കളഞ്ഞ് (2 × 1 സെന്റിമീറ്റർ കഷണം) –20 at at ന് ഫ്രീസുചെയ്യുകയും ചെയ്തു. ഡിഎൻഎ ഒറ്റപ്പെടൽ വരെ ഫ്രീസുചെയ്തു.
ഡിഎൻഎ ഒറ്റപ്പെടലിനുള്ള ഫംഗസിന്റെ ശുദ്ധമായ സംസ്കാരങ്ങൾ ദ്രാവക കടല മാധ്യമത്തിൽ വളർത്തി. ദ്രാവക മാധ്യമത്തിൽ നിന്ന് ഫംഗസിന്റെ മൈസീലിയം നീക്കംചെയ്തു, ഫിൽട്ടർ പേപ്പറിൽ ഉണക്കി, ദ്രാവക നൈട്രജനിൽ ഫ്രീസുചെയ്ത്, ഏകീകൃതമാക്കി, സിടിഎബി ബഫറിൽ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്തു, ക്ലോറോഫോം ഉപയോഗിച്ച് ശുദ്ധീകരിച്ചു, ഐസോപ്രോപനോൾ, 0.5 എം പൊട്ടാസ്യം അസറ്റേറ്റ് എന്നിവയുടെ മിശ്രിതം ഉപയോഗിച്ച് 2% മദ്യം ഉപയോഗിച്ച് രണ്ടുതവണ കഴുകി. തത്ഫലമായുണ്ടാകുന്ന ഡിഎൻഎ ഡയോണൈസ്ഡ് വെള്ളത്തിൽ ലയിപ്പിച്ച് –70 ° at (കുട്ടുസോവ മറ്റുള്ളവരും, 20) ൽ സൂക്ഷിച്ചു. ക്യുബിറ്റ് 2017 (ക്യാൻജെൻ, ജർമ്മനി) യിലെ ഇരട്ട ഒറ്റപ്പെട്ട ഡിഎൻഎയ്ക്കായി എച്ച്എസ് ഡിഎൻഎ ക്വാണ്ടിഫിക്കേഷൻ കിറ്റ് ഉപയോഗിച്ചാണ് ഡിഎൻഎ ഏകാഗ്രത അളക്കുന്നത്. മദ്യവും ഫ്രീസുചെയ്തതുമായ സാമ്പിളുകൾ ദ്രാവക നൈട്രജനിൽ ത്രിശൂലമാക്കി, തുടർന്ന് മുകളിൽ വിവരിച്ചതുപോലെ ഡിഎൻഎ വേർതിരിച്ചെടുക്കൽ നടത്തി (ശുദ്ധമായ ഫംഗസ് സംസ്കാരങ്ങളുടെ മൈസീലിയത്തിന്).
പട്ടിക 1. ഉപയോഗിച്ച ഫംഗസ് സമ്മർദ്ദങ്ങളുടെ ഉത്ഭവം
കൂൺ നാമം | പ്ലാന്റ്, അവയവം | തിരഞ്ഞെടുത്ത സ്ഥലം |
---|---|---|
കോലെറ്റോട്രികം കൊക്കോഡ്സ് 1, സി. കോക്കോഡ്സ് 2, സി. കൊക്കോഡ്സ് 3, ഇലിയോനെക്ട്രിയ ക്രാസ്സ, റൈസോക്റ്റോണിയ സോളാനി | ഉരുളക്കിഴങ്ങ് കിഴങ്ങുവർഗ്ഗം | കോസ്ട്രോമ മേഖല, ഒന്നാം ഫീൽഡ് ജനറേഷന്റെ ഉരുളക്കിഴങ്ങ് കിഴങ്ങുവർഗ്ഗങ്ങൾ, കൃഷി റെഡ് സ്കാർലറ്റ് |
കോലെറ്റോട്രികം കൊക്കോഡുകൾ 4 | ഉരുളക്കിഴങ്ങ് ഇല | റിപ്പ. മാരി എൽ, യോഷ്കർ-ഓല |
ഹെൽമിന്തോസ്പോറിയം സോളാനി | ഉരുളക്കിഴങ്ങ് കിഴങ്ങുവർഗ്ഗം | മഗദാൻ മേഖല, പോസ്. കൂടാരം, ഉരുളക്കിഴങ്ങ് കിഴങ്ങുവർഗ്ഗം |
ക്ലാഡോസ്പോറിയം ഫുൾവം | തക്കാളി ഇല | മോസ്കോ പ്രദേശം, വലിയ കായ്ക്കുന്ന തക്കാളി |
ആൾട്ടർനേറിയ തക്കാളി | തക്കാളി ഫലം | ഓൾ-റഷ്യൻ റിസർച്ച് ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് ഓഫ് പ്ലാന്റ് പ്രൊട്ടക്ഷന്റെ മൈക്കോളജി, ഫൈറ്റോപാത്തോളജി എന്നിവയുടെ ലബോറട്ടറിയിലെ സ്റ്റാഫ് സമർപ്പിച്ചു |
ഫ്യൂസാറിയം വെർട്ടിസിലിയം, ഫോമോപ്സിസ്ഫാസിയോലി, ആൾട്ടർനേറിയ ആൾട്ടർനേറ്റ, ഫെലിനസ് ഫെറുഗിനോവെലൂട്ടിനസ്, സ്റ്റെംഫിലിയം വെസിക്കേറിയം, ക്ലാഡോസ്പോറിയം ക്ലാഡോസ്പോറിയോയിഡുകൾ, അക്രോഡൊണ്ടിയം ലുസുല, പെൻസിലിയം എസ്പി. | തക്കാളി ഫലം | ക്രാസ്നോഡർ ടെറിട്ടറി, ക്രിംസ്കി ജില്ല, ഗ്രേഡ് ക്രീം |
ഫുസാരിയം ഓക്സിസ്പോറം | ഗോതമ്പ് റൂട്ട് | മോസ്കോ മേഖല |
ഡിടിപ്രൈം ആംപ്ലിഫയറിൽ (ഡിഎൻഎ-ടെക്നോളജി) പിസിആർ നടത്തി. സംഭവസ്ഥലത്തേക്കു വേണ്ടി, യഥാർത്ഥ പ്രിമെര്സ് ആൻഡ് നൊസ്റ്റാള്ജിയ: triphosphate ദെഹ്യ്ദ്രൊഗെനസെ മുന്തിയ ഇനം-നിർദ്ദിഷ്ട പ്രദേശം ഒരു അന്വേഷണം ജീൻ ഉപയോഗിച്ചു: ഫോർവേഡ് ധര്മത്തിന്റെ ചൊച്൭൦ഗ്ദ്ഫ് -ത്ചത്ഗതത്ചത്ത്ത്ച്ത്ച്ത്ചച്ഗ്ഗ്ച, റിവേഴ്സ് ധര്മത്തിന്റെ ചൊച്൨൮൦ഗ്ദ്ര് - തച്ത്ത്ഗഗ്ചത്ഗ്തഗ്ഗ്ച്ച്ത്ഗ്ഗ്ഗ്ത്൧). പ്രൈമറുകൾ 70 ബിപി മേഖല വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നു.
പ്രതികരണം മൊത്തം ഡിഎൻഎയുടെ 50 എൻജി (ഇലകളും കിഴങ്ങുകളും വിശകലനം ചെയ്യുമ്പോൾ) 10 എൻജി (ശുദ്ധമായ ഫംഗസ് സംസ്കാരങ്ങളുടെ ഡിഎൻഎ വിശകലനം ചെയ്യുമ്പോൾ) എടുത്തു. പ്രതികരണ മിശ്രിതം (35 μl) ഒരു പാരഫിൻ പാളി ഉപയോഗിച്ച് രണ്ട് ഭാഗങ്ങളായി വിഭജിച്ചു: താഴത്തെ ഒന്ന് (20 μl) 2 × പ്രതികരണ ബഫറിന്റെ 10 μl (750 mM Tris-HCl, pH 8.8; 200 mM (NH4) 2SO4; 25 mM MgCl2; 0.1% Tween-. 20), ഓരോ ഡിയോക്സിൻ ന്യൂക്ലിയോടൈഡ് ട്രൈഫോസ്ഫേറ്റിന്റെയും 0.5 എംഎം, ഓരോ പ്രൈമറിന്റെയും 7 പിഎംഎൽ, ജലാംശം ചെയ്യാവുന്ന ഫ്ലൂറസെന്റ് പേടകത്തിന്റെ 4 പിഎംഎൽ; മുകളിലെ ഒന്നിൽ 1 ×l 10 × പിസിആർ ബഫറും 1 യു ടാക് പോളിമറേസും അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു.
പാരഫിൻ ഉപയോഗിച്ച് മിശ്രിതം വേർതിരിക്കുന്നത് 5 ° C താപനിലയിൽ ട്യൂബുകളെ വളരെക്കാലം സൂക്ഷിക്കാനും 10 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിനു മുകളിലുള്ള താപനിലയിൽ 80 മിനിറ്റ് ചൂടാക്കിയ ശേഷം പിസിആറിന് ഒരു ചൂടുള്ള തുടക്കം നൽകാനും അനുവദിക്കുന്നു. ഇനിപ്പറയുന്ന പ്രോഗ്രാം അനുസരിച്ച് പിസിആർ നടപ്പാക്കി: 94.0 ° C - 90 സെ (1 ചക്രം); 94.0 ° C - 30 സെ; 64.0 ° C - 15 സെ (5 സൈക്കിളുകൾ); 94.0 ° C - 10 സെ; 64.0 ° C - 15 സെ (45 സൈക്കിളുകൾ); 10.0 ° C - സംഭരണം.
ഫലങ്ങളും ചർച്ചകളും
റഷ്യയിലെ വിവിധ പ്രദേശങ്ങളിലെ ഇലകൾ, കാണ്ഡം, ഉരുളക്കിഴങ്ങ് കിഴങ്ങുവർഗ്ഗങ്ങൾ, തക്കാളി പഴങ്ങൾ (കുട്ടുസോവ, 45) എന്നിവയിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ച 2018 സമ്മർദ്ദങ്ങളിൽ ഗ്ലിസറോൾ ട്രൈഫോസ്ഫേറ്റ് ഡൈഹൈഡ്രജനോയിസ് ജീനിന്റെ ക്രമം നിർണ്ണയിക്കപ്പെട്ടു. എല്ലാ സമ്മർദ്ദങ്ങളുടെയും അന്വേഷണ ശ്രേണികളെ രണ്ട് ന്യൂക്ലിയോടൈഡുകളായി വ്യത്യാസമുള്ള 2 ഗ്രൂപ്പുകളായി തിരിച്ചിരിക്കുന്നു. KY496634, KY496635 എന്നീ നമ്പറുകൾക്ക് കീഴിലുള്ള രണ്ട് ഗ്രൂപ്പുകളുടെയും പ്രതിനിധികളുടെ ന്യൂക്ലിയോടൈഡ് സീക്വൻസുകൾ ജെൻബാങ്കിൽ നിക്ഷേപിച്ചു.
പ്രൈമറുകളായ coc70gdf, coc280gdr, അവയുടെ അടിസ്ഥാനത്തിൽ രൂപകൽപ്പന ചെയ്ത cocgdz അന്വേഷണം എന്നിവ BLAST പ്രോഗ്രാം ഉപയോഗിച്ച് പരിശോധിച്ചു (www.ncbi.nlm.nih.gov/blast) കോലെറ്റോട്രിച്ചം ജനുസ്സിലെ ഗ്ലിസറോൾ ട്രൈഫോസ്ഫേറ്റ് ഡൈഹൈഡ്രജനോയിസ് ജീനിന്റെയും ജെൻബാങ്ക് ഡാറ്റാബേസിൽ ലഭ്യമായ മറ്റ് ജീവികളുടെയും എല്ലാ സീക്വൻസുകളിലും.
പ്രൈമറുകൾക്കും അന്വേഷണത്തിനും വളരെയധികം ഹോമോലോജസ് ഉള്ള മറ്റ് ജീവികളുടെ ഡിഎൻഎ പ്രദേശങ്ങളൊന്നും കണ്ടെത്തിയില്ല.
സി. കൊക്കോഡ്സ് ഡിഎൻഎ, ആന്ത്രാക്നോസ് ബാധിച്ച ഒരു ഉരുളക്കിഴങ്ങ് ഇലയുടെ ഡിഎൻഎ (മാരി എൽ, 2017 ൽ ശേഖരിച്ച വൈവിധ്യമാർന്ന റെഡ് സ്കാർലറ്റ്), കറുത്ത പുള്ളി ബാധിച്ച കിഴങ്ങുവർഗ്ഗങ്ങൾ (കോസ്ട്രോമ മേഖലയിൽ ശേഖരിച്ചത്) വൈവിധ്യമാർന്ന റെഡ് സ്കാർലറ്റ്, പട്ടിക 2). കിഴങ്ങുവർഗ്ഗങ്ങളിലും ഉരുളക്കിഴങ്ങ് ഇലകളിലും ഡിഎൻഎയുടെ സാന്നിധ്യം സ്ഥിരീകരിക്കുന്നതിന്, സി. കൊക്കോഡ് സമ്മർദ്ദങ്ങളെ അവയിൽ നിന്ന് ശുദ്ധമായ സംസ്കാരങ്ങളിലേക്ക് വേർതിരിച്ചു.
ടെസ്റ്റ് സിസ്റ്റത്തിന്റെ സംവേദനക്ഷമത വിശകലനത്തിന്റെ ഫലങ്ങൾ കാണിക്കുന്നത് പിസിആർ മിശ്രിതത്തിലെ മൊത്തം ഉള്ളടക്കം 0.05 എൻജിയിൽ കൂടുതലാകുമ്പോൾ ഒരു സാമ്പിളിലെ സി. കണ്ടെത്തുന്നതിന് ഇത് പര്യാപ്തമാണ്, കാരണം ഒരു സ്ക്ലെറോട്ടിയയിൽ ശരാശരി 0.131 എൻജി അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, ഒരു ബീജത്തിൽ 0.04 എൻജി ഡിഎൻഎ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു (കുള്ളൻ മറ്റുള്ളവരും, 2002). ഇംഗ്ലീഷ് ഗ്രൂപ്പ് വികസിപ്പിച്ചെടുത്ത ടെസ്റ്റ് സിസ്റ്റം (കുള്ളൻ മറ്റുള്ളവരും, 2002) സമാനമായ ഒരു സംവേദനക്ഷമത കാണിച്ചു (34 എൻജി ഡിഎൻഎയിൽ ത്രെഷോൾഡ് സൈക്കിൾ 0.05 ഉം 37 എൻജിയിൽ 0.005 ഉം).
എല്ലാ സാഹചര്യങ്ങളിലും സി. കൊക്കോഡുകൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്ന പ്രകൃതിദത്ത സാമ്പിളുകളുടെ വിശകലനം സാമ്പിളിലെ സാന്നിധ്യം വിശ്വസനീയമായി വെളിപ്പെടുത്താൻ സാധ്യമാക്കി (പട്ടിക 2). പ്രകൃതിദത്ത സസ്യങ്ങളുടെ സാമ്പിളുകളുടെ വിശകലനത്തിനും ഡിഎൻഎ ഒറ്റപ്പെടലിനുള്ള നിർദ്ദിഷ്ട രീതി ബാധകമായിരുന്നു.
പട്ടിക 2. തത്സമയ പിസിആറിനായി കൊളോട്ടോട്രികം കൊക്കോഡുകൾ തിരിച്ചറിയുന്നതിനുള്ള നിർദ്ദിഷ്ട ടെസ്റ്റ് സിസ്റ്റത്തിന്റെ സംവേദനക്ഷമത നിർണ്ണയിക്കുക
Образец | സാമ്പിളിലെ ഡിഎൻഎ തുക *, എൻജി | പരിധി ചക്രം | C. കോക്കോഡുകൾ കണ്ടെത്തൽ |
---|---|---|---|
മൈസീലിയം കൊളോട്ടോട്രികം കൊക്കോഡുകൾ | 50 | 21.3 | + |
5 | 25.7 | + | |
0.5 | 29,7 | + | |
0.05 | 33.5 | + | |
0.005 | 40 | - | |
0.0005 | 42.8 | - | |
0.00005 | - | ||
കിഴങ്ങു തൊലി 1 | 50 | 32 | + |
കിഴങ്ങു തൊലി 2 | 50 | 30 | + |
കിഴങ്ങു തൊലി 3 | 50 | 31.5 | + |
ഉരുളക്കിഴങ്ങ് ഇല | 50 | 29.5 | + |
കുറിപ്പ്. * പിസിആർ ഉൽപ്പന്നങ്ങളുടെ മിശ്രിതത്തിൽ.
15 ഇനം ഫംഗസുകളിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചെടുത്ത ഡിഎൻഎ സാമ്പിളുകളിൽ ടെസ്റ്റ് സിസ്റ്റത്തിന്റെ പ്രത്യേകത പരിശോധിച്ചു. ബാധിച്ചതും ആരോഗ്യകരവുമായ പഴങ്ങളിൽ നിന്നും തക്കാളി, ഉരുളക്കിഴങ്ങ് കിഴങ്ങുവർഗ്ഗങ്ങളിൽ നിന്നും ഫംഗസിന്റെ എല്ലാ സമ്മർദ്ദങ്ങളും രചയിതാക്കൾ വേർതിരിച്ചു; ഒരു ബുദ്ധിമുട്ട് ഗോതമ്പ് വേരിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചു (പട്ടിക 1). പഴത്തിന്റെ ഉപരിതലത്തിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചെടുത്ത ഇനങ്ങളിൽ, തക്കാളിക്ക് രോഗകാരികളല്ലാത്ത ഇനങ്ങളും ഉണ്ട് (ഉദാഹരണത്തിന്, ഫെല്ലിനസ് ഫെറുഗിനോവെലൂട്ടിനസ്).
സി. കൊക്കോഡ്സ് ഡിഎൻഎ 20-27 എന്ന ത്രെഷോൾഡ് സൈക്കിളിൽ കണ്ടെത്തിയതായി പഠനങ്ങൾ തെളിയിച്ചിട്ടുണ്ട്, അതേസമയം മറ്റ് ഫംഗസ് ഇനങ്ങളെ കണ്ടെത്തിയില്ല അല്ലെങ്കിൽ 40 ആം സൈക്കിളിന് ശേഷം ഒരു സിഗ്നൽ നൽകി, ഇത് നിർദ്ദിഷ്ട ശബ്ദ ഇഫക്റ്റിന് കാരണമാകാം (പട്ടിക 3).
പട്ടിക 3. വിവിധ തരം കൂൺ പരീക്ഷണ സംവിധാനം പരിശോധിക്കുന്നു
കൂൺ നാമം | പരിധി ചക്രം |
കോലെറ്റോട്രികം കൊക്കോഡുകൾ 1 | 20.9 |
സി. കൊക്കോഡുകൾ 2 | 22.6 |
സി. കൊക്കോഡുകൾ 3 | 23 |
സി. കൊക്കോഡുകൾ 4 | 22 |
ഫുസാരിയം ഓക്സിസ്പോറം | > 40 |
എഫ്. വെർട്ടിസിലിയം | > 40 |
Rhizoctonia solani | > 40 |
ഫോമോപ്സിസ് ഫേസോളി | > 40 |
ആൾട്ടർനേറിയ ആൾട്ടർനേറ്റ | > 40 |
A. തക്കാളി | > 40 |
ഹെൽമിന്തോസ്പോറിയം സോളാനി | > 40 |
ഫെലിനസ് ഫെറുഗിനോവെലൂട്ടിനസ് | > 40 |
സ്റ്റെംഫിലിയം വെസിക്കേറിയം | > 40 |
ഇലിയോനെക്ട്രിയ ക്രാസ്സ | > 40 |
ക്ലാഡോസ്പോറിയം ക്ലാഡോസ്പോറിയോയിഡുകൾ | > 40 |
സി. ഫുൾവം | > 40 |
അക്രോഡൊണ്ടിയം ലുസുല | > 40 |
പെൻസിലോലിയം SP. | > 40 |
കുറിപ്പ്. * എല്ലാ സാമ്പിളുകളിലും ഡിഎൻഎയുടെ അളവ് 10 എൻജി ആയിരുന്നു.
വികസിപ്പിച്ച പരീക്ഷണ സമ്പ്രദായം തക്കാളി ഇല സാമ്പിളുകളിൽ സി. കൊക്കോഡുകൾ നെക്രോട്രോഫിക്ക് രോഗകാരികളുടെയും വിത്ത് ഉരുളക്കിഴങ്ങ് കിഴങ്ങുവർഗ്ഗങ്ങളുടെയും ലക്ഷണങ്ങളോടെ തിരിച്ചറിയാൻ ഉപയോഗിച്ചു. പഠനത്തിനായി, കോസ്ട്രോമ, മോസ്കോ, കലുഗ, നിഷ്നി നോവ്ഗൊറോഡ് പ്രദേശങ്ങളിൽ വളരുന്ന വിവിധ ഇനങ്ങളുടെ വിത്ത് കിഴങ്ങുവർഗ്ഗങ്ങൾ ഞങ്ങൾ എടുത്തു. സി. കൊക്കോഡ്സ് ഡിഎൻഎയുടെ സാന്നിദ്ധ്യം സാമ്പിളുകളിൽ പ്രാധാന്യമർഹിക്കുന്നു, വിശകലനത്തിൽ ത്രെഷോൾഡ് ചക്രം 35 കവിയരുത്. 0.05 എൻജി സി. കൊക്കോഡ്സ് ഡിഎൻഎയുടെ (ത്രെഷോൾഡ് സൈക്കിൾ 33.5, പട്ടിക 2) വിശ്വസനീയമായ നിർണ്ണയത്തെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയാണ് ഈ പരിധി തിരഞ്ഞെടുത്തത്. 40 ന് മുകളിലുള്ള ത്രെഷോൾഡ് സൈക്കിളുകൾ, മറ്റ് ചില ഇനം ഫംഗസുകളുടെ നിർദ്ദിഷ്ട ഡിഎൻഎ കണ്ടെത്തി. ഈ സമീപനത്തിലൂടെ, കോസ്ട്രോമ, മോസ്കോ, കലുഗ പ്രദേശങ്ങളിൽ വളരുന്ന കിഴങ്ങുവർഗ്ഗങ്ങളുടെ 5 സാമ്പിളുകളിലും ക്രാസ്നോഡാർ മേഖലയിലെ യെസ്ക് ജില്ലയിൽ നിന്നുള്ള ഒരു തക്കാളി ഇലയിലും സി. കൊക്കോഡ്സ് ഡിഎൻഎയുടെ സാന്നിധ്യം കണ്ടെത്തി (പട്ടിക 4, 5).
പട്ടിക 4. ഉരുളക്കിഴങ്ങ് കിഴങ്ങുകളിൽ കൊളോട്ടോട്രികം കൊക്കോഡുകൾ കണ്ടെത്തൽ *
സാമ്പിൾ നമ്പർ | ഉരുളക്കിഴങ്ങ് മുറികൾ | വളർച്ചയുടെ സ്ഥലം | C. കോക്കോഡുകൾ കണ്ടെത്തൽ | പരിധി ചക്രം |
---|---|---|---|---|
1 | ചുവന്ന സ്കാർലറ്റ് | കോസ്ട്രോമ മേഖല | + | 35 |
2 | + | 35 | ||
3 | - | 38 | ||
4 | സാന്റെ | മോസ്കോ മേഖല | + | 34 |
5 | - | |||
6 | - | 41 | ||
7 | - | 41.8 | ||
8 | + | 30 | ||
9 | Zhukovsky നേരത്തെ | മോസ്കോ മേഖല | - | 40.5 |
10 | - | 40.6 | ||
11 | - | |||
12 | മോളി | Kaluga മേഖല. | + | 34.3 |
13 | - | 38.4 | ||
14 | ഫാന്റസി | Kaluga മേഖല. | - | |
15 | ഗാല | നിസ്സെ നാവ്ഗോർഡ് മേഖല | - | |
16 | - |
കുറിപ്പ്. * എല്ലാ സാമ്പിളുകളിലും ഡിഎൻഎയുടെ അളവ് 50 എൻജി ആയിരുന്നു.
പട്ടിക 5. തക്കാളി ഇലകളിൽ കൊളോട്ടോട്രികം കൊക്കോഡുകൾ കണ്ടെത്തൽ *
സാമ്പിൾ നമ്പർ | വളർച്ചയുടെ സ്ഥലം | C. കോക്കോഡുകൾ കണ്ടെത്തൽ | പരിധി ചക്രം |
---|---|---|---|
1 | ക്രാസ്നോദർ ടെറിട്ടറി, ക്രിമിയൻ ജില്ല | - | |
2 | - | ||
3 | - | ||
4 | - | 45 | |
5 | - | ||
6 | - | ||
7 | - | ||
8 | - | ||
9 | ക്രാസ്നോദർ ടെറിട്ടറി, യെസ്ക് ജില്ല | - | 39.2 |
10 | - | 40.8 | |
11 | - | ||
12 | - | 41.6 | |
13 | - | 40 | |
14 | - | 41 | |
15 | - | 41.9 | |
16 | - | ||
17 | - | ||
18 | - | 40.3 | |
19 | - | ||
20 | - | ||
21 | + | 34.5 | |
22 | - | ||
23 | - |
* എല്ലാ സാമ്പിളുകളിലും ഡിഎൻഎയുടെ അളവ് 50 എൻജി ആയിരുന്നു.
ബ്രിട്ടീഷ് ഗവേഷകർ (കുള്ളൻ മറ്റുള്ളവർ, 2002) സംവേദനക്ഷമതയിലും പ്രത്യേകതയിലും വികസിപ്പിച്ചതിനേക്കാൾ താഴ്ന്നതല്ല ഞങ്ങൾ സൃഷ്ടിച്ച പരീക്ഷണ സംവിധാനം, സസ്യങ്ങളുടെ സാമ്പിളുകളുടെ വിശകലനത്തിന് അനുയോജ്യമാണ്. വിത്ത് കിഴങ്ങുകളുടെ വിശകലനത്തിനായുള്ള അതിന്റെ പ്രയോഗം കേടുപാടുകളുടെ ബാഹ്യ അടയാളങ്ങളില്ലാതെ കിഴങ്ങുകളിൽ സി. കൊക്കോഡ്സ് ഡിഎൻഎ തിരിച്ചറിയാനും ഇലകളുടെ അണുബാധ വിജയകരമായി വിശകലനം ചെയ്യാനും സാധിച്ചു.
ഇന്നുവരെ, സി. കൊക്കോഡ്സ് ബാധയ്ക്കുള്ള ഉരുളക്കിഴങ്ങ് കിഴങ്ങുവർഗ്ഗങ്ങളുടെ വിശകലനം റഷ്യയിൽ നടത്തിയിട്ടില്ല. ഞങ്ങളുടെ ആദ്യ പഠനം റഷ്യൻ ഫെഡറേഷന്റെ വിവിധ പ്രദേശങ്ങളിൽ വളർത്തിയ 16 പരീക്ഷിച്ച വിത്ത് കിഴങ്ങുകളിൽ 5 എണ്ണത്തിൽ സി കൊക്കോഡുകൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നതായി കാണിച്ചു. റഷ്യയിൽ ഉരുളക്കിഴങ്ങ് കിഴങ്ങുവർഗ്ഗങ്ങളുടെ കറുത്ത പുള്ളി ഒരു സാധാരണ ഉരുളക്കിഴങ്ങ് രോഗമാണെന്ന് ഇത് കാണിക്കുന്നു, ഉരുളക്കിഴങ്ങ് വിളയുടെ അളവും ഗുണനിലവാരവും കുറയ്ക്കുന്നതിൽ അതിന്റെ പങ്ക് കുറച്ചുകാണുന്നു.
തക്കാളി ഇലകളുടെ വിശകലനത്തിൽ ക്രാസ്നോഡാർ ടെറിട്ടറിയിലെ യെസ്ക് ഡിസ്ട്രിക്റ്റിൽ നിന്നുള്ള ഒരു ഇലയിൽ സി. കൊക്കോഡ്സ് ഡിഎൻഎയുടെ സാന്നിധ്യം കണ്ടെത്തി. നേരത്തെ, തെക്കൻ റഷ്യയിലെ തക്കാളി പാടങ്ങൾ ബ്രിട്ടീഷ് ടെസ്റ്റ് സമ്പ്രദായം (കുള്ളൻ മറ്റുള്ളവർ, 2002) ഉപയോഗിച്ച് പരിശോധിക്കുമ്പോൾ, സി. കൊക്കോഡുകൾ അടങ്ങിയ ഇലകൾ കണ്ടെത്തി, ചില മേഖലകളിൽ സി. കൊക്കോഡുകൾ ബാധിച്ച ഇലകളുടെ ഉയർന്ന അനുപാതം കണ്ടെത്തി (ബെലോവ് മറ്റുള്ളവരും. 2018). മോസ്കോ മേഖലയിലെ ക്രാസ്നോഡറിലും പ്രിമോർസ്കി പ്രദേശങ്ങളിലും ഞങ്ങൾ തക്കാളി പഴങ്ങൾ കണ്ടെത്തി, അതിൽ നിന്ന് സി. കൊക്കോഡുകളുടെ ശുദ്ധമായ സംസ്കാരങ്ങളെ ഒറ്റപ്പെടുത്താൻ ഞങ്ങൾക്ക് കഴിഞ്ഞു. സി കൊക്കോഡുകൾ റഷ്യയിൽ തക്കാളിയിൽ ഇപ്പോൾ വ്യാപകമായി വിശ്വസിക്കപ്പെടുന്നതിനേക്കാൾ വളരെ വ്യാപകമായിരിക്കാം, മാത്രമല്ല അതിന്റെ ദോഷവും കുറച്ചുകാണുന്നു.
അങ്ങനെ, ഇന്നുവരെ, ഉരുളക്കിഴങ്ങ്, തക്കാളി എന്നിവയിൽ സി. കൊക്കോഡുകളുടെ വ്യാപകമായ വിതരണത്തെക്കുറിച്ച് മതിയായ വിവരങ്ങൾ ശേഖരിച്ചു.
ഉരുളക്കിഴങ്ങ്, തക്കാളി രോഗങ്ങളുടെ വികാസത്തിൽ ഈ ഫംഗസിന്റെ പങ്ക് നന്നായി മനസിലാക്കാൻ, റഷ്യയിൽ അതിന്റെ വ്യാപനം നിരീക്ഷിക്കുക, മണ്ണിന്റെയും വിത്ത് അണുബാധയുടെയും പങ്ക് പഠിക്കുക, സംഭരണ സമയത്ത് ഉണ്ടാകുന്ന നഷ്ടങ്ങളിൽ കറുത്ത പുള്ളിയുടെ പങ്ക് എന്നിവ ആവശ്യമാണ്. പിസിആർ ഡയഗ്നോസ്റ്റിക്സിന്റെ ഉപയോഗം ഈ ജോലിയെ ഗണ്യമായി സുഗമമാക്കും, കൂടാതെ രണ്ട് ടെസ്റ്റ് സിസ്റ്റങ്ങളുടെയും ഒരേസമയം ഉപയോഗിക്കുന്നത് വിശകലനത്തിന്റെ കൃത്യതയെ ഗണ്യമായി വർദ്ധിപ്പിക്കും.
റഷ്യൻ സയൻസ് ഫ Foundation ണ്ടേഷൻ നമ്പർ 18-76-00009 ൽ നിന്നുള്ള ഗ്രാന്റ് ഈ ജോലിയെ പിന്തുണച്ചിട്ടുണ്ട്.
ലേഖനം "മൈക്കോളജി ആൻഡ് ഫൈറ്റോപാത്തോളജി" (വാല്യം 54, നമ്പർ 1, 2020) ജേണലിൽ പ്രസിദ്ധീകരിച്ചു.