എ.ഐ. പോളിനോവ, ഡി.ആർ. സാഗിറോവ, എൽ.യു. കൊകേവ, ഐ.ഐ. ബുസ്കോ, ഐ.വി. ലെവന്റ്സെവിച്ച്, എസ്.എൻ. എലൻസ്കി
സമീപ വർഷങ്ങളിൽ, ഉരുളക്കിഴങ്ങ് നടീലുകളുടെയും വിത്ത് സ്റ്റോക്കിന്റെയും ഫൈറ്റോസാനിറ്ററി അവസ്ഥ ബെലാറസിൽ ഗണ്യമായി വഷളായി. ചിലതരം ദോഷകരമായ ജീവികളുടെ പങ്ക്, അഗ്രോഫൈറ്റോസെനോസുകളിൽ അവയുടെ അനുപാതം മാറിയിരിക്കുന്നു. വ്യാപകമായ രോഗങ്ങൾ (വൈകി വരൾച്ച, ആദ്യകാല വരൾച്ച, എല്ലാത്തരം ചുണങ്ങു, ബാക്ടീരിയോസിസ്, ഡ്രൈ ഫ്യൂസേറിയം ചെംചീയൽ) മാത്രമല്ല, മുറിവ് വെള്ളമുള്ള ചെംചീയൽ പോലുള്ള വേണ്ടത്ര പഠിക്കാത്ത പുതിയ രോഗങ്ങളും വർദ്ധിച്ചു (ചിത്രം 1). ഇന്ത്യയിലും മധ്യേഷ്യയിലും മറ്റ് തെക്കൻ രാജ്യങ്ങളിലും കാണപ്പെടുന്ന ഈ രോഗം ബെലാറസിലെ ഗോമെൽ, ബ്രെസ്റ്റ്, ഗ്രോഡ്നോ, മിൻസ്ക് പ്രദേശങ്ങളിൽ ശ്രദ്ധിക്കപ്പെട്ടു. മറ്റ് മണ്ണിൽ വസിക്കുന്ന ഒമിസെറ്റുകളെപ്പോലെ, പി. അൾട്ടിമവും അമിതമായ ഈർപ്പം, മോശമായി വറ്റാത്ത പ്രദേശങ്ങളിൽ, നീണ്ടുനിൽക്കുന്ന മഴക്കാലത്ത് വൻതോതിലുള്ള നിഖേദ് ഉണ്ടാക്കുന്നു (ടെയ്ലർ et al., 2008).
ബെലാറസിൽ, വളരുന്ന സീസണിലെ താപനില വർദ്ധിക്കുന്ന വർഷങ്ങളിൽ രോഗത്തിന്റെ വ്യാപനം ശ്രദ്ധിക്കപ്പെട്ടു: ചില ബാച്ചുകളിൽ ഉരുളക്കിഴങ്ങിൽ, 8-10% കിഴങ്ങുവർഗ്ഗങ്ങൾ ബാധിച്ചു. കിഴങ്ങുവർഗ്ഗങ്ങളുടെ വെള്ളമുള്ള മുറിവ് ചെംചീയൽ കാര്യമായ നാശത്തിന് കാരണമാകും, ഇത് പ്രതിരോധശേഷിയുള്ള ഇനങ്ങളുടെ അഭാവം, വികസിപ്പിച്ച സംരക്ഷണ നടപടികൾ, കിഴങ്ങുവർഗ്ഗങ്ങളെ ബാധിക്കുമ്പോൾ രോഗത്തിന്റെ ദ്രുതഗതിയിലുള്ള വികസനം എന്നിവയാൽ സംഭവിക്കുന്നു (Zhuromskaya, 2003; Ivanyuk et al., 2005). കിഴങ്ങുവർഗ്ഗങ്ങളെ മാത്രമേ രോഗം ബാധിക്കുകയുള്ളൂ. റഷ്യയിൽ, മുറിവ് വെള്ളമുള്ള ചെംചീയൽ ഇതുവരെ പ്രാധാന്യമർഹിക്കുന്നില്ല.
ഈ കൃതിയിൽ, ബെലാറസിലെ നാഷണൽ അക്കാദമി ഓഫ് സയൻസസിന്റെ സയന്റിഫിക് ആന്റ് പ്രാക്ടിക്കൽ സെന്ററിലെ സംഭരണ കേന്ദ്രങ്ങളിൽ വെക്താർ ബെലോറുസ്കി, സ്കാർബ്, ബ്രീഡിംഗ് ഹൈബ്രിഡ് എന്നീ ഉരുളക്കിഴങ്ങുകളുടെ ബാധിത കിഴങ്ങുകളിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചെടുത്ത മുറിവ് വെള്ള ചെംചീയലിന് കാരണമാകുന്ന 4 ഇനം ഞങ്ങൾ പഠിച്ചു. ഉരുളക്കിഴങ്ങ്, ഹോർട്ടികൾച്ചർ (മിൻസ്ക് മേഖല). ഒറ്റപ്പെട്ട ഐസൊലേറ്റുകളുടെ സ്പീഷീസ് നിർണ്ണയിക്കുക, ഉരുളക്കിഴങ്ങ് കിഴങ്ങുവർഗ്ഗങ്ങളുമായി ബന്ധപ്പെട്ട് അവയുടെ വൈറലൻസ്, വ്യത്യസ്ത അന്തരീക്ഷ ഊഷ്മാവിലെ വളർച്ച, മെറ്റലാക്സൈലിനോടുള്ള പ്രതിരോധം എന്നിവ വിലയിരുത്തുക എന്നിവയാണ് പഠനത്തിന്റെ ലക്ഷ്യങ്ങൾ.
ഐസൊലേറ്റുകളുടെ മൈസീലിയം ഒരു ലിക്വിഡ് പയർ മീഡിയത്തിലാണ് വളർന്നത് (180 ഗ്രാം ഫ്രോസൺ ഗ്രീൻ പീസ് 10 ലിറ്റർ വാറ്റിയെടുത്ത വെള്ളത്തിൽ 1 മിനിറ്റ് തിളപ്പിക്കും, അതിനുശേഷം 30 എടിഎമ്മിൽ 1 മിനിറ്റ് ഓട്ടോക്ലേവ് ചെയ്യുന്നു); ഓരോ സ്ട്രെയിനിൽ നിന്നും ഡിഎൻഎ വേർതിരിച്ചു. ഡിഎൻഎ വേർതിരിക്കാൻ, ശീതീകരിച്ച മൈസീലിയം ലിക്വിഡ് നൈട്രജനിൽ ട്രിച്ചുറേറ്റ് ചെയ്യുകയും സിടിഎബി ബഫറിൽ ലൈസ് ചെയ്യുകയും ക്ലോറോഫോം ഉപയോഗിച്ച് ഡിപ്രോട്ടീനൈസ് ചെയ്യുകയും ചെയ്തു. ഡിഎൻഎ -20 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ ഡീയോണൈസ്ഡ് വെള്ളത്തിൽ സംഭരിച്ചു. പ്രൈമറുകൾ ITS18, ITS5,8 (വൈറ്റ്, 1) ഉപയോഗിച്ച് ആംപ്ലിഫൈ ചെയ്ത ജീനോമിലെ സ്പീഷിസ്-നിർദ്ദിഷ്ട മേഖലകളുടെ ന്യൂക്ലിയോടൈഡ് സീക്വൻസുകളുടെ വിശകലനം (ന്യൂക്ലിയർ റൈബോസോമൽ ജീനുകളുടെ മേഖലകൾ 1S, 2S, അതുപോലെ തന്നെ ആന്തരിക ട്രാൻസ്ക്രൈബ് ചെയ്ത ഇന്റർജെനിക് സ്പെയ്സർ ITS1990). പിത്തിയം അൾട്ടിമം ട്രോ എന്ന ഇനത്തിൽ പെടുന്നവയാണ്. (syn. Globisporangium ultimum (Trow) Uzuhashi, Tojo & Kakish).
പഠിച്ച എല്ലാ ഇനങ്ങളും നനഞ്ഞ അറകളിൽ സ്ഥാപിച്ചിരിക്കുന്ന ഗാല ഇനത്തിന്റെ ഉരുളക്കിഴങ്ങ് കിഴങ്ങുകളുടെ കഷ്ണങ്ങളെ ബാധിച്ചു. അവയിൽ കറുത്ത പാടുകൾ രൂപം കൊള്ളുന്നു, പിന്നീട് ഈർപ്പമുള്ളതും ആഴത്തിൽ തുളച്ചുകയറുന്നതുമായ അൾസറായി മാറുന്നു (ചിത്രം 2). ഒരു കിഴങ്ങുവർഗ്ഗ സ്ലൈസിന്റെ മധ്യത്തിൽ പി അൾട്ടിമം മൈസീലിയം സ്ഥാപിച്ചാണ് അണുബാധ നടത്തിയത്.
കുത്തിവയ്പ്പ് ട്യൂബറസ് ഡിസ്കുകൾ +22 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്തു. ബാധിത പ്രദേശത്തിന്റെ വളർച്ചയുടെ പരമാവധി നിരക്ക് ആദ്യ 2 ദിവസങ്ങളിൽ രേഖപ്പെടുത്തി, പിന്നീട് അൾസറിന്റെ വിസ്തീർണ്ണം പ്രായോഗികമായി മാറ്റമില്ലാതെ തുടർന്നു.
പഠിച്ച എല്ലാ സ്ട്രെയിനുകൾക്കും ഈ പാറ്റേൺ ശരിയാണ്.
5, 15, 24, 34 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസ് താപനിലയിൽ ഓട്സ് അഗർ മീഡിയത്തിൽ സമ്മർദ്ദങ്ങളുടെ വളർച്ചാ നിരക്ക് വിലയിരുത്തി (ചിത്രം 3). എല്ലാ താപനിലയിലും വളർച്ച നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടു; പരമാവധി വളർച്ചാ നിരക്ക് 24 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ രേഖപ്പെടുത്തി (86 ദിവസത്തിനുള്ളിൽ 2 എംഎം കപ്പ് പൂർണ്ണമായും പടർന്നു). 15, 34 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ, വളർച്ചാ നിരക്ക് ഗണ്യമായി കുറഞ്ഞു (യഥാക്രമം 4, 3 ദിവസങ്ങളിൽ കപ്പ് പടർന്നു).
15, 24, 34 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസ് താപനിലയിൽ, പഠിച്ച എല്ലാ സ്ട്രെയിനുകളുടെയും വളർച്ചാ നിരക്ക് വ്യത്യാസപ്പെട്ടില്ല. 5 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസ് താപനിലയിൽ, സ്ട്രെയിൻ പി 1 മറ്റുള്ളവയേക്കാൾ വളരെ വേഗത്തിൽ വളർന്നു (ദിവസം 20-ൽ 4 മില്ലിമീറ്റർ), സ്ട്രെയിൻ പി 4 കുറച്ച് സാവധാനത്തിൽ (ദിവസം 10 മില്ലിമീറ്റർ), പി 4, പി 2 എന്നിവ പ്രായോഗികമായി വളർന്നില്ല.
24 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസ് താപനിലയിൽ, ഒരു വിഭവത്തിൽ നട്ടതിനുശേഷം ഉടൻ തന്നെ വളർച്ച ആരംഭിച്ചു എന്നതും ശ്രദ്ധിക്കേണ്ടതാണ്; 15, 34 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസ് താപനിലയിൽ, സജീവ വളർച്ചയുടെ ആരംഭം 1 ദിവസം വൈകി; 5 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ, 2 ദിവസം.
മെറ്റാലാക്സിൽ (അതിന്റെ ഐസോമർ മെഫെനോക്സാം) മണ്ണിന്റെ ഓമിസെറ്റുകളുടെ നിയന്ത്രണത്തിനുള്ള ഏറ്റവും ഫലപ്രദമായ മരുന്നായി അംഗീകരിക്കപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു. കിഴങ്ങുവർഗ്ഗങ്ങളിൽ തുളച്ചുകയറാനും (വളരെ കുറഞ്ഞ സാന്ദ്രതയിൽ പോലും) അവയുടെ ദീർഘകാല സംരക്ഷണം നൽകാനും Metalaxyl-ന് കഴിയും (Taylor et al., 2008, Bruin et al., 1982). എന്നിരുന്നാലും, ജനസംഖ്യയിൽ പ്രതിരോധശേഷിയുള്ള സ്ട്രെയിനുകൾ ഉയർന്നുവന്നതിനുശേഷം മെറ്റലാക്സൈലിന്റെ ഫലപ്രാപ്തി കുത്തനെ കുറയുന്നു. യുഎസ്എയുടെ പല പ്രദേശങ്ങളിലും ഉയർന്ന പ്രതിരോധശേഷിയുള്ള സ്ട്രെയിനുകൾ കണ്ടെത്തിയിട്ടുണ്ട് (ടെയ്ലർ et al., 2002). മെറ്റാലാക്സിലിനോടുള്ള പി. അൾട്ടിമത്തിന്റെ ബെലാറഷ്യൻ സ്ട്രെയിനുകളുടെ പ്രതിരോധത്തെക്കുറിച്ച് വിവരങ്ങളൊന്നുമില്ല, അതിനാൽ ഈ സൃഷ്ടിയിൽ മരുന്നിനോടുള്ള അവരുടെ പ്രതിരോധം പരിശോധിക്കാൻ തീരുമാനിച്ചു.
മെറ്റാലാക്സിൽ എന്ന കുമിൾനാശിനിയുടെ സംവേദനക്ഷമതയെക്കുറിച്ചുള്ള പഠനം വിവിധ സാന്ദ്രതകളിൽ കുമിൾനാശിനികൾക്കൊപ്പം ചേർത്ത ഓട്സ് അഗർ മീഡിയത്തിലാണ് നടത്തിയത് (Pobedinskaya and Elansky, 2014).
പഠിച്ച സ്ട്രെയിനുകൾക്ക് മെറ്റാലാക്സിലിനോടുള്ള പ്രതിരോധത്തിൽ ചില വ്യത്യാസങ്ങൾ ഉണ്ടായിരുന്നു (പട്ടിക 1). അങ്ങനെ, 1 mg/l എന്ന കുമിൾനാശിനി സാന്ദ്രതയിൽ, സ്ട്രെയിൻ P4 ന്റെ വളർച്ച പൂർണ്ണമായും നിലച്ചു, അതേസമയം മറ്റ് സ്ട്രെയിനുകളുടെ വളർച്ച വളരെ മന്ദഗതിയിലായി. 1 mg/l എന്ന മെറ്റാലാക്സിൽ സാന്ദ്രതയുള്ള ഒരു മാധ്യമത്തിൽ P2, P10 സ്ട്രെയിനുകൾ വളരെ സാവധാനത്തിൽ വളർന്നു. കണക്കാക്കിയ ഫലപ്രദമായ EC50 കോൺസൺട്രേഷൻ (നിയന്ത്രണവുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ സ്ട്രെയിനിന്റെ വളർച്ചാ നിരക്ക് 2 മടങ്ങ് മന്ദഗതിയിലാക്കുന്ന കുമിൾനാശിനി സാന്ദ്രത) 1 mg/l-ൽ താഴെയാണ്. അങ്ങനെ, പഠിച്ച എല്ലാ സമ്മർദ്ദങ്ങളും മെറ്റലാക്സിലിന് വിധേയമാണ്; പി. അൾട്ടിമത്തിന്റെ വളർച്ചയെ അടിച്ചമർത്തുന്നതിൽ ഇത് വളരെ ഫലപ്രദമാണെന്ന് തെളിയിക്കപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട്.
Bruin et al പ്രകാരം. (1982) 0,5 കി.ഗ്രാം/ഹെക്ടർ എന്ന അളവിൽ മെറ്റാലാക്സിൽ ഉപയോഗിച്ച് സസ്യങ്ങളെ ചികിത്സിച്ചതിന് ശേഷം, കിഴങ്ങുകളിൽ കുമിൾനാശിനിയുടെ ശേഖരണം പെരിഡെർമിൽ 0,055 μg/g, കോർട്ടിക് പാളിയിൽ 0,022 μg/g, 0,034 μg/g എന്നിങ്ങനെയാണ്. കിഴങ്ങിന്റെ മധ്യഭാഗം. ഞങ്ങളുടെ ഡാറ്റ അനുസരിച്ച്, രോഗത്തെ പ്രതിരോധിക്കാൻ മെറ്റാലാക്സൈലിന്റെ അത്തരം സാന്ദ്രത മതിയാകില്ല, പക്ഷേ അത് അതിന്റെ വികസനം മന്ദഗതിയിലാക്കാം.
ഓട്സ് മീഡിയത്തിൽ വളരുമ്പോൾ, എല്ലാ സ്ട്രെയിനുകളും മോണോകൾച്ചറിൽ ഓസ്പോറുകൾ രൂപപ്പെട്ടു (ചിത്രം 4), ഇത് പി അൾട്ടിമത്തിന് സാധാരണമാണ്. സ്ട്രെയിനുകൾ ജോടിയായി വിഭജിക്കുന്നത് തുമ്പില് പൊരുത്തക്കേടിന്റെ ദൃശ്യമായ ലക്ഷണങ്ങളൊന്നും വെളിപ്പെടുത്തിയില്ല - കപ്പുകൾ തുല്യമായി മൈസീലിയം കൊണ്ട് മൂടിയിരുന്നു.
ലഭിച്ച ഡാറ്റ സൂചിപ്പിക്കുന്നത് P. അൾട്ടിമം ഒരു ഫൈറ്റോപഥോജൻ ആണ്, ഇത് 5 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസ് താപനിലയിൽ ഉൾപ്പെടെ, വിശാലമായ താപനിലയിൽ ദ്രുതഗതിയിലുള്ള വളർച്ചയ്ക്ക് പ്രാപ്തമാണ്. ഇത് കിഴങ്ങ് കിഴങ്ങുകളുടെ ടിഷ്യൂകൾക്ക് വൈറസ് ബാധയുള്ളതും ദീർഘകാല പ്രവർത്തനക്ഷമതയുള്ള ഓസ്പോറുകളെ രൂപപ്പെടുത്തുന്നതുമാണ്. അതിനാൽ, കൃഷിക്ക് ഭീഷണിയായേക്കാവുന്ന അപകടകരമായ ഫൈറ്റോപഥോജൻ ആണ് ഈ ഇനം, കൂടുതൽ പഠനം ആവശ്യമാണ്.
റഷ്യൻ സയൻസ് ഫൗണ്ടേഷൻ (പ്രോജക്റ്റ് നമ്പർ 14-50-00029) ഈ പഠനത്തെ പിന്തുണച്ചു.
പട്ടിക 1. മെറ്റലാക്സിലിലേക്കുള്ള പി. അൾട്ടിമം സ്ട്രെയിനുകളുടെ സംവേദനക്ഷമത
ബുദ്ധിമുട്ട് | മെറ്റാലാക്സിൽ സാന്ദ്രത, mg/l | ||
0 (നിയന്ത്രണം) | 1 | 10 | |
P1 | 63 | 6 | 0 |
P2 | 65 | 5 | 0 |
P3 | 59 | 0 | 0 |
P4 | 61 | 0 | 0 |
P1 | 105 | 10 | 3 |
P2 | 110 | 10 | 3 |
P3 | 95 | 0 | 0 |
P4 | 98 | 0 | 0 |
കുറിപ്പ്. 3 അളവുകൾക്കുള്ള ശരാശരി ഡാറ്റ നൽകിയിരിക്കുന്നു.
ലേഖനം "ഉരുളക്കിഴങ്ങ് സംരക്ഷണം" (നമ്പർ 1, 2017) ജേണലിൽ പ്രസിദ്ധീകരിച്ചു.